Клишина И. И.: Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Введение

Здоровье человека в городской среде подвержено множеству разрушительных факторов. Среди них: загрязненные воздух и вода, шумы, воздействие электромагнитных волн, стрессы. Поэтому все больше исследователей ищут возможности создания препарата, который поддержит здоровье людей. Решая эту задачу, многие из них обращаются  к продуктам пчеловодства. Если мед и пыльца уже довольно хорошо изучены, то применение трутневого расплода еще можно долго исследовать. Представляем научную работу фармацевта Инны Клишиной. Она называется «Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации». Исследовательница высказала и ряд предположений. Например, теперь достоверно известно, что данный продукт защищает печень. Также трутневый расплод – отличная поддержка иммунитета.

Этот продукт пока еще мало изучен, хотя широко применяется в  ряде стран. Например, в Китае он веками используется для лечения неврастении, гепатита, артритов и лейкопений. В Японии трутневый расплод применяют для  приготовления приправы. В Румынии созданы лекарственные препараты на его основе.

Данная книга описывает лабораторные исследования гомогената. Ученые попытались определить его токсичность. Также их интересовало,  защищает ли продукт печень, не вызывает ли аллергию. Для этого автор работы с помощниками провела серию экспериментов над лабораторными животными – белыми крысами и мышами. В соответствии с правилами животных разделили на несколько опытных и контрольных групп. В начале исследования всем грызунам искусственно вызвали интоксикацию печени.

В первых группах грызунам вводили водную суспензию гомогената трутневых личинок, а в контрольных –  препараты сравнения. Это гепатозащитное лекарство «Лив.52» индийского производства, «Апилак» из Эстонии и прополис. Затем ученые исследовали кровь и печень животных, желая понять какие изменения произошли.

 

Свойства трутневого гомогената

В ходе исследований ученые доказали, что трутневый расплод относится к практически нетоксичным веществам и абсолютно не аллергенен — не вызывает аллергии. Еще они выяснили важные свойства трутневого гомогената. Подтвердилось предположение, что он восстанавливает функции печени. Данное свойство  было лучше выражено, когда крысам вводили более сильную дозу препарата. Также установлено, что гомогенат заметно укрепляет иммунную систему организма. Благотворное действие трутневого расплода на печень и иммунитет сопоставимо с эффектом от применения прополиса. При этом оно оказалось гораздо сильнее известных препаратов «Апилак» и «Лив.52».

Помимо этого у грызунов под влиянием гомогената повысилось содержание общего белка и нуклеиновых кислот в печени. Это говорит об антиоксидантном и анаболическом свойствах трутневого гомогената.

В диссертации содержится обширный обзор продуктов пчеловодства. Работа содержит рисунки, таблицы и графики. Книга будет полезна медикам и фармацевтам, а также всем, кто интересуется апипродуктами.

Эти исследования внесли вклад в изучение трутневого расплода, заложили основу для создания новых лекарственных препаратов. Добавим, что сегодня в России гомогенат уже используют при производстве пищевых добавок. Компания «Парафарм» выпускает витаминный комплекс «Леветон Форте» и группу препаратов «Остеомед». Их благотворное действие уже оценили многие в нашей стране и ближнем Зарубежье.

 

ПЯТИГОРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ

14.00.25 – фармакология, клиническая фармакология

Диссертация
на соискание учёной степени
кандидата фармацевтических наук
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор
Василенко Ю.К.,
Пятигорск, 2003 г.

Автор:

КЛИШИНА ИННА ИВАНОВНА

ВЛИЯНИЕ ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА
НА АКТИВНОСТЬ ФАКТОРОВ
НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ
И ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ
ПРИ ОСТРОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

Список сокращений

АЛТ – аланинаминотрансфераза
БАСК – бактерицидная активность сыворотки крови
БФ – белковая фракция
ГТЛ – гомогенат трутневых личинок
ЛТЛ – лиофилизат трутневых личинок
ЛФ – липидная фракция
НК – нуклеиновые кислоты
ПЗФ – процент завершенности фагоцитоза
ППН – показатель повреждения нейтрофилов
ТБКАП – ТБК-активные продукты
ФАЛ – фагоцитарная активность лейкоцитов
ФИЛ – фагоцитарный индекс лейкоцитов
ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы
ЩФ – щелочная фосфатаза

 

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. ПРОДУКТЫ ПЧЕЛОВОДСТВА. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ПРИМЕНЕНИЕ

• Химический состав и применение традиционных продуктов пчеловодства.
• Иммунотропная активность продуктов пчеловодства.
• Химический состав и применение трутневого расплода.
• Заключение.

Часть II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Характеристика гомогената и лиофилизата трутневых личинок.

2.2. Лабораторные животные и постановка опытов.

2.3 Фармакологические и биохимические методы исследования.

• Иммунологические методы исследования.
• Гистоморфологические методы исследования.
• Статистическая обработка результатов исследования.

Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРОДУКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА У ИНТАКТНЫХ ЖИВОТНЫХ.

• Определение острой токсичности гомогената и лиофилизата трутневых личинок.

• Определение гепатотоксичности гомогената и лиофлизата трутневых личинок.

• Определение показателей аллергизации при введении трутневого расплода.

• Сравнительное влияние лиофилизата трутневых личинок, прополиса, апилака и лив-52 на показатели функционального состояния печени.
• Сравнительное влияние лиофилизата трутневых личинок, прополиса, апилака и лив-52 на показатели неспецифической резистентности.
• Заключение.

Глава 4. ВЛИЯНИЕ ГОМОГЕНАТА ТРУТНЕВЫХ ЛИЧИНОК НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОЙ И ИЗОНИАЗИДОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ.

• Изменение показателей функционального состояния печени при тетрахлорметановой интоксикации.

• Изменение показателей функционального состояния печени при изониазидовой интоксикации.

• Изменение показателей неспецифической резистентности при тетрахлорметановой интоксикации.

• Изменение показателей неспецифической резистентности при изониазидовой интоксикации.
• Заключение.

Глава 5. ВЛИЯНИЕ ЛИОФИЛИЗАТА ТРУТНЕВЫХ ЛИЧИНОК НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ.

5.1. Изменение показателей функционального состояния печени при введении разных доз лиофилизата трутневых личинок.

5.2. Изменение показателей неспецифической резистентности при введении разных доз лиофилизата трутневых личинок.

Заключение.

Глава 6. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПРОДУКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА И ОФИЦИАЛЬНОГО ГЕПАТОПРОТЕКТОРА НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ.

• Изменение показателей функционального состояния печени.
• Изменение показателей неспецифической резистентности.
• Заключение.

Глава 7. НЕКОТОРЫЕ СТОРОНЫ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ ТРУТНЕВЫХ ЛИЧИНОК ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ.

• Изучение гепатопротекторной активности «белковой» и «липидной» фракций гомогената трутневых личинок.
• Изучение влияния «белковой» и «липидной» фракций гомогената трутневых личинок на активность факторов неспецифической резистентности в условиях тетрахлорметановой интоксикации.
• Изменение гистоморфологических показателей в печени.
• Изменение содержания ТБК-активных продуктов.
• Изучение анаболических показателей.
• Заключение.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы.

Глобальное экологическое неблагополучие, увеличение темпов производства, хронические стрессы приводят к нарушению обменных процессов организма человека, выражающихся в так называемых «болезнях цивилизации» (Натарова H.A., 2001), в число которых входят поражения печени, обезвреживающей мощный поток ксенобиотиков (Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., 1998, Логинов A.C., 1999, Шерлок Ш. и др., 1999), и нарушения иммунного гомеостаза, обусловленного как специфическими, так и неспецифическими механизмами (Утешев Б.С. и др., 1995, Маянский А.Н. и др., 1995, Тефанова В.Т. и др., 2001). Поэтому вопросы первичной профилактики и лечения иммунопатологических состояний, сочетающихся с нарушением функционального состояния печени, делают чрезвычайно актуальным поиск новых эффективных средств с гепатозащитной и иммуномодулирующей активностью (Комиссарова И.А., Нарциссов Я.Р., 1999; Дадали В.А.,1999).

В качестве таких средств могут выступать продукты пчеловодства, в том числе трутневый расплод, являющийся «банком» биологически активных веществ (Бурмистрова Л.А., 1999; Лазарян Д.С., 2002; Connor J, 1981). По многим параметрам химического состава трутневый расплод сходен с маточным молочком, что позволяет прогнозировать большой потенциал его биологической активности (Т.В. Вахонина, 1995; А.Ф. Синяков, 1995, Бурмистрова Л.А., 1999, Лазарян Д.С., 2002).

Имеются некоторые экспериментальные доказательства лечебной эффективности трутневых личинок при ряде заболеваний, в том числе при гепатитах (Илиешиу Н.В.,1983; Узбекова Д.Г., 1993; Филиппов Ю.А., 1995). Однако в научной литературе нет данных по общетоксическому, сенсибилизирующему действию, по влиянию на активность факторов неспецифической резистентности (естественный иммунитет) и белково- синтетическую функцию нативного трутневого расплода и его лиофилизированной формы. Не изучены действующие начала трутневого расплода. Такая ограниченность экспериментальных доказательств биологической активности и терапевтического действия трутневого расплода не позволяет в полной мере реализовать его лечебные свойства.

Всё это позволяет сделать вывод об актуальности изучения фармакологической активности трутневых личинок с целью обоснования применения их в медицинской и диетологической практике, в частности в условиях химической и лекарственной интоксикации, сопровождающейся нарушением факторов естественного иммунитета и поражением печени.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы является экспериментальное обоснование коррекции трутневыми личинками нарушений активности факторов неспецифической резистентности и функционального состояния печени при химической и лекарственной интоксикации.

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи:

1. Определение острой токсичности, гепатотоксичности, аллергенности трутневых личинок в нативной и лиофилизированной форме у интактных животных.
2. Выявление и оценка влияния нативного трутневого расплода и его лиофилизированной формы на клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности в условиях тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикации.
3. Изучение выраженности гепатопротекторного действия нативной и лиофилизированной форм трутневого расплода в условиях тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикации.
4. Оценка роли в реализации гепатозащитного и иммунотропного действия гидрофильной («белковой») и липофильной («липидной») фракций трутневого расплода.
5. Сравнительная оценка влияния на функциональное состояние печени и естественную резистентность трутневых личинок в нативной и лиофилизированной форме, прополиса, апилака и официального гепатопротектора лив-52 в условиях тетрахлорметановой интоксикации.
6. Изучение некоторых сторон механизма гепатозащитного действия трутневого расплода.

 

Научная новизна

Установлено иммуномодулирующее влияние трутневого расплода на гуморальные и клеточные факторы неспецифической резистентности при химической и лекарственной интоксикации, коррелирующее с его гепатопротекторной активностью. Впервые оценена выраженность гепатозащитного действия отдельных фракций гомогената трутневых личинок («белковой» и «липидной») и установлена их иммуномодулирующая активность в отношении клеточных и гуморальных факторов неспецифической резистентности. Впервые проведена комплексная сравнительная оценка гепатопротекторного, антиоксидантного и иммуномодулирующего эффектов гомогената трутневых личинок и его «белковой» и «липидной» фракций, прополиса, апилака и лив-52 при тетрахлорметановой интоксикации. Изучены показатели острой токсичности, гепатотоксичности и установлено отсутствие сенсибилизирующих свойств у трутневого расплода.

Теоретическое и практическое значение работы.

Выявленное выраженное влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок, «белковой» и «липидной» фракций гомогената трутневых личинок на функциональное состояние печени и активность факторов неспецифической резистентности в условиях химической и лекарственной интоксикации (тетрахлорметаном и изониазидом) предопределяет целесообразность использования их в комплексной терапии больных туберкулезом, а также больных с токсическим гепатитом, развивающимся при длительном применении ряда лекарственных средств (в частности, изониазида) и при контактах с веществами, имеющими близкий к тетрахлорметану механизм поражения печени.

Результаты работы могут расширить круг показаний к применению трутневого расплода в апитерапии и способствовать определению перспектив его использования в качестве доступного и эффективного отечественного лекарственного сырья или составляющей пищевых добавок.

Внедрение результатов исследования в практику

Разработано информационное письмо «Экспериментальное обоснование применения гомогената и лиофилизата трутневого расплода в качестве средства с гепатопротекторной и иммуномодулирующей активностью в отношении факторов естественного иммунитета», на основании которого получены акты внедрения материалов диссертации в лекционный курс по фармакологии ПятГФА, а также в лечебно-профилактическую деятельность пятигорских санаториев «Родник» и «Тарханы». Материалы исследования включены в пояснительную записку к ТУ 9882-039-01962942-2001 «Апилар». Получена приоритетная справка за № 2002113824 от 27 мая 2002 г. на патент на изобретение «Гомогенат и лиофилизат трутневых личинок, обладающие гиполипидемической и гепатозащитной активностью». Основные положения, выносимые на защиту:

1. Гомогенат и лиофилизат трутневых личинок у животных с тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикацией обладают выраженным гепатопротекторным действием, связанным с их антиоксидантной и анаболической активностью и превосходящим действие препарата лив-52.
2. В реализации гепатозащитной активности гомогената и лиофилизата трутневых личинок из двух фракций больший вклад принадлежит «белковой» фракции.
3. Гомогенат, лиофилизат трутневых личинок, «белковая» фракция гомогената и в меньшей мере – «липидная» фракция трутневых личинок обладают иммуномодулирующей активностью в отношении гуморальных и клеточных факторов естественного иммунитета.
4. Гомогенат трутневых личинок и его лмофилизированная форма не обладают токсичностью и не вызывают сенсибилизации организма.

Апробация и публикация результатов исследования. Основные результаты исследования доложены на 54, 55 региональных научно-практических конференциях по фармакологии, фармации и подготовке кадров (г. Пятигорск, 1999г., 2000г.), научно-практической конференции «Актуальные вопросы курортной науки в России» (г. Пятигорск, 2000 г.). По теме диссертации опубликовано 10 работ.

Связь задач исследований с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно- исследовательских работ Пятигорской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01200204765) в рамках проблемы «Фармация» ученого совета Минздрава РФ № 38. Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 150 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (6 глав), общего заключения и выводов, списка литературы, включающего 180 источников, в том числе 15 иностранных. Работа иллюстрирована 34 таблицами и 12 рисунками.

 

 

1. Клишина. И.И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Оглавление.
2. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Введение.
3. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации.  Часть I. Обзор литературы.
4. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Часть I. Глава 1. Продукты пчеловодства. Общая характеристика и применение.
5. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Часть II. Собственные исследования.
6. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Часть II. Глава 2. Материалы и методы собственных исследований.
7. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации.  Часть II. Глава 3. Исследование фармакологической активности продуктов пчеловодства у интактных животных.
8. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. . Часть II. Глава 4. Влияние гомогената трутнвых личинок на функциональное состояние печени и неспецифическую резистентность при тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикации.
9. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Часть II. Глава 5. Влияние лиофилизата трутневых личинок на функциональное состояние печени и неспецифическую резистентность при тетрахлорметановой интоксикации.
10. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Часть II. Глава 6. Сравнительное влияние различных продуктов пчеловодства и официального гепатопротектора на функциональное состояние печени и неспецифическую резистентность при тетрахлорметановой интоксикации.
11. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Часть II. Глава 7. Некоторые стороны механизма действия трутневых личинок при тетрахлорметановой интоксикации.
12. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Общее заключение и выводы.
13. Клишина И. И. Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации. Список литературы..