Исследование функциональной активности личинок трутней. Часть 2

Фуцзяньский университет НУНЛИНЬ.
Магистерская диссертация

 Исследование функциональной
активности личинок трутней

 Специальность:
Профилактика вредных насекомых в сельском хозяйстве

Специализация:
Использование полезных насекомых и глубокая переработка

Аспирант: Ду Инган

Научный руководитель: преп. Мяо Сяоцин

Дата завершения: апрель 2004 года

Dissertation for Master Degree of Fujian Agriculture and Foresty University

Studies on the Function and Activation of Honeybee Drone Larvae

Specialty: Agricultural Insects and Pest Control

Study field: Beneficial Insects Utilization and Deep Process

Name: Du Ying-gang

Supervisor: Prof. Miao Xiao-Qing

Finished at: Apr,2004

3 Результаты и анализ

1.1 Определение содержания влаги

Расчёт влагосодержания: X₁%=(m₁–m₂)/(m₁–m₃)×100,

где X₁ – содержание влаги в образце, %;

m₁ – вес ёмкости для взвешивания (бюксы) (либо выпарной чаши с песком и стеклянной палочкой) и образца, г;

m₂ – вес ёмкости для взвешивания (бюксы) (либо выпарной чаши с песком и стеклянной палочкой) и образца после сушки, г;

m₃ – вес ёмкости для взвешивания (бюксы) (либо выпарной чаши с песком и стеклянной палочкой), г.

Влагосодержание личинок трутня и лекарства китайской медицины приведены в таблице 3.1.

Таблица 3.1 – Влагосодержание личинок трутня и лекарства китайской медицины

Table 3.1 The content of water in drone larvae and Chinese herbal medicine

Тип образца	Вес до сушки (г)	Вес после сушки (г)	Влагосодержание (%)	Среднее влагосодержание (%)
Личинки трутня	7,7809	1,8452	76,29	76,45
	8,0651	1,8988	76,46
	8,3211	1,9477	76,60
Порошок лекарства китайской медицины	9,240	8,5396	7,58	7,66
	8,5503	7,8877	7,75
	10,3217	9,5331	7,64

 

 

1.2 Испытание на пищевую безопасность

1.2.1   Испытание на острую токсичность

1.2.1.1 Испытание личинок трутней на острую токсичность

Состояние всех мышей из группы с малыми дозировками образца – без отклонений. В группе мышей, принимающих образец в дозировке 46,4 г/кг, после завершения принятия образца, кроме снижения количества потребляемой пищи, других отклонений замечено не было. В группе, принимающей образец в дозировке 100 г/кг, в первые два дня были обнаружены симптомы отравления: снижение активности, снижение количества потребляемой пищи, загрязнение промежности, пучеглазие, опущенность век, топорщение шерсти и рассеянность сознания. Впоследствии состояние мышей вернулось к норме. После 14 дневного наблюдения, отклонений от нормы обнаружено не было. При вскрытии отклонений от нормы обнаружено не было. Смертность нулевая. При взвешивании, разницы в весе между особями разных групп обнаружено не было. Получаемое по методу Хорна значение LD₅₀ из таблицы больше 100 г/кг.

 

 

1.2.1.2 Испытание на острую токсичность

Состояние всех мышей из группы с малыми дозировками образца – без отклонений. В группе мышей, принимающих образец в дозировке 46,4 г/кг, после завершения принятия образца, кроме снижения количества потребляемой пищи, других отклонений замечено не было. В группе, принимающей образец в дозировке 100 г/кг, в первые два дня были обнаружены симптомы отравления: снижение активности, снижение количества потребляемой пищи, загрязнение промежности, пучеглазие, опущенность век, топорщение шерсти и рассеянность сознания.

Впоследствии состояние мышей вернулось к норме. После 14 дневного наблюдения, отклонений от нормы обнаружено не было. При вскрытии отклонений от нормы обнаружено не было. Смертность нулевая. При взвешивании, вес особей, принимающих образец в максимальной дозировке, по сравнению с группой, принимавшей образец в дозировке 10 г/кг был заметно снижен. Среднее значение снижения веса: 2,235 г. Получаемое по методу Хорна значение LD₅₀ из таблицы больше 100 г/кг.

 

 

1.2.1.3 Исследование на определение острой токсичности при употреблении личинок трутней совместно с лекарством китайской медицины

Результат идентичен пункту 3.2.1.1. Получаемое по методу Хорна значение LD₅₀ из таблицы больше 100 г/кг.

 

 

1.2.2   Испытание на генотоксичность

1.2.2.1 Микроядерный тест костного мозга

1.2.2.1.1 Исследование микроядер костного мозга после употребления личинок трутней

 

Таблица 3.2 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на микроядра костного мозга мышей

Table 3. 2 The effect of drone larvae on marrow microkernel of mice

Испытуемый образец	Дозировка	Количество животных	PCE	P/N	MNPCE	MN(‰)±SD
	(г/кг)	(шт.)	(шт./особь)	Отношение	MN
Личинки трутня в пастообразном состоянии	1,0	5	1000	≥1	9	1,8±0,8367
	5,0	5	1000	≥1	8	1,6±0,5477
	10,0	5	1000	≥1	10	2,0±0,7071
	20,0	5	1000	≥1	13	2,6±0,8944
Положительный контроль CP	0,04	5	1000	<1	109	21,8±3,8341**
Отрицательный контроль NS	5,0	5	1000	≥1	11	2,2±0,4472

1.2.2.1.2 Исследование микроядер костного мозга
после употребления лекарства китайской медицины

 

Таблица 3.3 – Влияние лекарства китайской медицины в различных дозировках на микроядра костного мозга мышей

Table 3.3 The effect of Chinese herbal medicine on marrow microkernel of mice

Испытуемый образец	Дозировка	Количество животных	PCE	P/N	MNPCE	MN(‰)±SD
	(г/кг)	(шт.)	(шт./особь)	Отношение	MN
Лекарство китайской медицины в пастообразном состоянии	1,0	5	1000	≥1	11	2,2±0,8367
	5,0	5	1000	≥1	10	2,0±0,6325
	10,0	5	1000	≥1	12	2,4±0,5477
	20,0	5	1000	<1	31	6,2±1,3038*
Положительный контроль CP	0,04	5	1000	<1	109	21,8±3,8341**
Отрицательный контроль NS	5,0	5	1000	≥1	11	2,2±0,4472

 

1.2.2.1.3 Исследование микроядер в костном мозге при употреблении смеси
личинок трутней с лекарством китайской медицины

 

Таблица 3.4 Влияние смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины в различных дозировках на микроядра в костном мозге у мышей.

Table 3.4 The effect of drone larvae and Chinese herbal medicine mixture on marrow microkernel of mice

Испытуемый образец	Дозировка	Количество животных	PCE	P/N	MNPCE	MN(‰)±SD
	(г/кг)	(шт.)	(шт./особь)	Отношение	MN
Смесь личинок трутня и	1,0	5	1000	≥1	9	1,8±0,9521
лекарства китайской медицины	5,0	5	1000	≥1	9	1,8±0,8112
	10,0	5	1000	≥1	13	2,6±0,9147
	20,0	5	1000	≥1	17	3,6±1,1402
Положительный контроль CP	0,04	5	1000	＜1	109	21,8±3,8341**
Отрицательный контроль NS	5,0	5	1000	≥1	11	2,2±0,4472

 

 

1.2.2.2 Тест на аберрацию сперматозоидов у мышей.

1.2.2.2.1 Тест на аберрацию сперматозоидов у мышей после употребления личинок трутней

Таблица 3.5 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на Аберрацию сперматозоидов у мышей

Table 3.5 The effect of drone larvae on sperm aberration of mice

Испытуемый образец	Дозировка	Количество животных	Количество сперматозоидов (шт./особь)	Количество сперматозоидов с аномальной морфологией (M)		MN(‰)±SD
	(г/кг)	(шт.)
Личинки трутня в пастообразном состоянии	1,0	5	1000	59		11,8±2,5884
	5,0	5	1000	61		12,2±1,9235
	10,0	5	1000	60		12,0±1,5811
	20,0	5	1000	71		14,2±3,1145
Положительный контроль CP	0,05	5	1000	299		59,8±9,5237**
Отрицательный контроль NS	5,0	5	1000	67		13,4±1,5166

 

 

1.2.2.2.2 Тест на аберрацию сперматозоидов у мышей после
употребления лекарства китайской медицины

Таблица 3.6 – Влияние лекарства китайской медицины в различных дозировках на Аберрацию сперматозоидов у мышей

Table 3.6 The effect of Chinese herbal medicine on sperm aberration of mice

Испытуемый образец	Дозировка	Количество животных	Количество сперматозоидов (шт./особь)	Количество сперматозоидов с аномальной морфологией (M)		MN(‰)±SD
	(г/кг)	(шт.)
Лекарство китайской медицины в пастообразном состоянии	1,0	5	1000	56		11,2±3,1145
	5,0	5	1000	63		12,6±2,7019
	10,0	5	1000	72		14,4±3,0496
	20,0	5	1000	115		23,0±6,8920
Положительный контроль CP	0,05	5	1000	299		59,8±9,5237**
Отрицательный контроль NS	5,0	5	1000	67		13,4±1,5166

 

1.2.2.2.3 Тест на аберрацию сперматозоидов у мышей после употребления
смеси личинок трутней с лекарством китайской медицины

Таблица 3.7 – Влияние смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины в различных дозировках на Аберрацию сперматозоидов у мышей.

Table 3.7 The effect of drone larvae and Chinese herbal medicine mixture on sperm aberration of mice

Испытуемый образец	Дозировка	Количество животных	Количество сперматозоидов (шт./особь)		Количество сперматозоидов с аномальной морфологией (M)	MN(‰)±SD
	(г/кг)	(шт.)
Смесь личинок трутня и	1,0	5	1000	68		13,6±4,0514
лекарства китайской медицины	5,0	5	1000	64		12,8±3,2124
	10,0	5	1000	79		15,8±5,6533
	20,0	5	1000	87		17,4±4,8677
Положительный контроль CP	0,05	5	1000	299		59,8±9,5237**
Отрицательный контроль NS		5	1000	67		13,4±1,5166

Из исследования №3.2.2 можно увидеть, что личинки трутня при дозировках, согласно которых проводились исследования, совершенно не имеют генетической токсичности и являются полностью безопасными.

При отдельном исследовании лекарства китайской медицины, генетическая токсичность присутствует только при дозировке выше 20 г/кг, и в сравнении с группой положительного контроля имеющиеся отклонения крайне малы. Смесь личинок трутней и лекарства китайской медицины в дозировках, согласно которых проводились исследования, также не имеет генетической токсичности. Это говорит о том, что употребление личинок трутней в смеси с лекарством китайской медицины заметно снизило генетическую токсичность лекарства китайской медицины.

Исходя из результатов исследования острой токсичности и генетической токсичности, можно увидеть, что личинки трутней и смесь личинок трутней и лекарства китайской медицины полностью безопасны. Употребление отдельно лекарства китайской медицины также довольно безопасно.

 

 

1.3 Испытание на сопротивление усталости и стрессу

1.3.1   Испытание на сопротивление усталости

1.3.1.1 Испытание плаванием с утяжелением

Влияние личинок трутней в различных дозировках на время плавание мышей приведено в таблице 3.8.

Таблица 3.8 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на время плавания мышей с утяжелением

Table 3.8 Living time of mice forced to swim with clog after administering drone larvae

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Время плавания (сек.) M±SD
1	0,0	10	422,1±32,49
2	0,25	10	486±65,21**
3	0,5	10	500,4±38,02**
4	0,75	10	539,9±33,71**
5	1,0	10	648,8±30,71**
6	3,0	10	994,1±73,30**
7	5,0	10	990,9±66,84**
8	7,0	10	826,4±41,85**
9	9,0	10	594,1±31,97**
10	11,0	10	410,8±23,68

 

1.3.1.2 Испытание с удержанием на жерди

Влияние личинок трутней в различных дозировках на время удержания мыши на жерди приведено в таблице 3.9.

Таблица 3.9 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на время удержания мыши на жерди

Table 3.9 Time of mice kept on pole after administering drone larvae

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Время удержания на жерди (сек.) M±SD
1	0,0	10	325±24,24
2	1,0	10	384,5±33,24**
3	3,0	10	624,9±30,50**
4	5,0	10	635±33,16**
5	7,0	10	393±39,54**

 

 

1.3.1.3 Измерение количества молочной кислоты в крови

Расчёт содержания молочной кислоты в крови:

Содержание молочной кислоты в крови (мг/100мл) = A_{измер.проб.}/A_{калебр.проб.}×100

Влияние личинок трутней в различных дозировках на содержание молочной кислоты в крови мышей при выполнении физической работы приведено в таблице 3.10.

Таблица 3.10 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на содержание молочной кислоты в крови мышей при выполнении физической работы

Table 3.10 The effect of drone larvae on mice’s blood lactic acid after administering drone larvae

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Значение количества молочной кислоты (мг/100мл)
1	0,0	10	49,64±5,9887
2	1,0	10	44,10±4,3884*
3	3,0	10	35,84±4,5707**
4	5,0	10	35,91±4,7811**
5	7,0	10	42,40±4,5297**

 

 

1.3.1.4 Азот мочевины сыворотки крови

Расчёт: азот мочевины крови (ммоль/л) = 8,3181×(образец (A₂-A₁))/(Калибровка(A₂-A₁)

Влияние личинок трутней в различных дозировках на количество азота мочевины крови при выполнении физической нагрузки приведено в таблице 3.11.

Таблица 3.11 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на количество азота мочевины крови при выполнении физической нагрузки

Table 3.11 The effect of drone larvae on mice7 s blood urea nitrogen after administering drone larvae

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Азот мочевины сыворотки крови (ммоль/л) M±SD
1	0,0	10	19,7258±2,0352
2	0,25	10	18,6563±2,6304
3	0,5	10	17,4680±2,3799
4	0,75	10	17,5868±1,3491
5	1,0	10	17,3492±2,3898
6	3,0	10	15,9232±1,7890*
7	5,0	10	15,8044±1,3778**
8	7,0	10	17,1115±1,2774
9	9,0	10	17,9433±1,1817
10	11,0	10	20,5576±1,3779

 

 

1.3.1.5 Определение лактатдегидрогеназы

Расчёт: △A/min×3376=Активность LDH (ед./л).

Влияние личинок трутней в различных дозировках на лактатдегидрогеназу мышей приведено в таблице 3.12.

Таблица 3.2 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на лактатдегидрогеназу мышей

Table 3.12 The effect of drone larvae on mice’s lactic acid dehydrogenation enzyme after administering drone larvae

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Лактатдегидрогеназа (ед./л) M±SD
1	0,0	10	281,2208±33,4224
2	0,25	10	320,7200±35,9038*
3	0,5	10	332,5360±31,8796**
4	0,75	10	336,5872±35,3028**
5	1,0	10	336,2496±40,1744**
6	3,0	10	343,6768±44,5835**
7	5,0	10	346,0400±34,6952**
8	7,0	10	344,3520±29,1720**
9	9,0	10	326,1216±37,2947**
10	11,0	10	276,1568±39,6849

 

 

1.3.1.6 Определение гликогена печени

Расчёт количества гликогена: количество миллиграмм гликогена содержащихся в 100 граммах тканей печени (DU/DS)×0,5×(объем экстрагированной жидкости/количество граммов тканей печени)×100×0.9

DU: степень поглощения излучения пробирки с образцом

DS: степень поглощения излучения стандартной пробирки

0,5: содержание глюкозы в 0,5 мл раствора глюкозы.

0,9: коэффициент пересчёта глюкозы в гликоген

Влияние личинок трутней в различных дозировках на содержание гликогена печени после выполнения физической работы приведено в таблице 3.13.

 

Таблица 3.13 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на содержание гликогена печени после выполнения физической работы

Table 3.13 The effect of drone larvae on hepatic of mice’ s liver after administering drone larvae

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Содержание гликогена (г/100г) M±SD
1	0,0	10	1,2695±0,3327
2	1,0	10	2,0280±0,2191**
3	3,0	10	3,0998±0,5300**
4	5,0	10	3,9060±0,3290**
5	7,0	10	2,7172±0,3406**

 

Согласно стандарту для определения сопротивляемости усталости, в следствии употребления функциональной пищи, личинки трутней имеют отличную способность увеличить сопротивляемость усталости. Главными особенностями действия по сопротивлению усталости являются уменьшение расхода кислорода организмом и повышение адаптируемости организма к переменам внешних и внутренних факторов среды, где проявлением внешних факторов является увеличение выносливости во время физических нагрузок. Результат проведённых испытаний продемонстрировал способность личинок трутней заметно продлить время плавания с утяжелением и время удержания мышей на жерди. Даже при минимальных дозировках их эффективность уже заметна. Личинки трутней способны заметно снизить содержание молочной кислоты в крови и азота мочевины в сыворотке крови при выполнении мышами физической работы, повысить количество сахара, запасаемого в крови, повысить активность лактатдегидрогеназы. В совокупности, всё это говорит о возможности личинок трутней продлить время аэробного дыхания и повысить сопротивляемость усталости. Исходя из полученных данных, эффективность личинок трутней в повышении сопротивляемости усталости крайне очевидна и является всесторонней.

Из графика 3.1 и таблицы 3.14 можно увидеть, что влияние личинок трутней на оценку сопротивляемости усталости во всех испытаниях имеет очень схожую тенденцию. Это говорит о том, что питательные компоненты, содержащиеся в личинках трутней, оказывают всестороннее действие и не просто стимулируют какой-либо отдельный орган в организме, либо изменяют уровень какого-либо гормона, а оказывают действие на весь организм в целом.

 

 

График тенденций влияния различных показателей, полученных в следствии проведения испытаний по оценке сопротивления усталости в следствии употребления личинок трутней изображён на рис. 3.1.

Ось ординат: значение показателя

Ось абсцисс: дозировка (г/кг)

◆ Время плавания

■ Лактатдегидрогеназа

× Удержание на шесте

Азот мочевины крови

✲Содержание молочной кислоты в крови

● Гликоген печени

 

Рис. 3.1 – Сравнение тенденций всех показателей, полученных в следствии проведения соответствующих исследований для оценки сопротивления усталости в следствии употребления личинок трутней

Fig.3.1 The comparison of all indexes in anti-fatigue experiments

Показатели, полученные в результате исследования влияния личинок трутней на повышение сопротивления стрессу и их взаимосвязь с некоторыми другими показателями приведена в таблице 3.14.

Таблица 3.14 – Показатели, полученные в результате исследования влияния личинок трутней на повышение сопротивления стрессу и их взаимосвязь с некоторыми другими показателями

Table 3.14 Analysis of all indexes in mice1 s anti-fatigue experiments

	Уравнение линии тренда	Наилучшая дозировка (г/кг)	Значение коэффициента корреляции r между временем плавания и другими группами
Время плавания (сек.)	y=-18,919x2+198,13x+441,09	5,24
Время удержания на жерди (сек.)	y=-23,366x2+180,96x+285,67	3,87	0,730**
Содержание молочной кислоты в крови (мг/100мл)	y=0,8752x2-7,1992x+49,911	4,11	-0,880**
Азот мочевины сыворотки крови (ммоль/л)	y=0,1276x2-1,222x+18,733	4,79	-0,895**
Лактатдегидрогеназа (Ед./л)	y=-1,9402x2+18,388x+311,05	4,74	0,981**
Гликоген печени (г/100г)	y=-0,1212x2+1,0899x+1,1526	4,50	0,955**

 

 

1.3.2   Испытание на стрессоустойчивость

Влияние личинок трутней в различных дозировках на сопротивляемость мышей стрессу приведено в таблице 3.15

Таблица 3.15 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на сопротивляемость мышей стрессу

Table 3.15 Living time of mice placed in high or low temperature conditions

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Время смерти в следствии стресса вызванного высокой температурой (сек.)	Время смерти в следствии стресса вызванного низкой температурой (сек.)
1	0,0	10	723,1±53,59	4353,8±201,86
2	1,0	10	741,1±80,84	4508,4±264,04
3	3,0	10	908,0±45,34**	5158,6±160,53**
4	5,0	10	830,9±50,05**	4775,9±180,33**
5	7,0	10	789,3±87,17*	4545,3±302,43

Исследование на сопротивляемость стрессу наглядно демонстрирует способность личинок трутней значительно повышать способность испытуемых мышей к сопротивлению высоким и низким температурам. Уравнение линии тренда по данным исследования устойчивости мышей к высоким и низким температурам и наилучшая дозировка, соответственно: y=-48,163x²+363,69x+4313,7, 3,78 г/кг; y=-10,3x²+82,597x+707,21, г/кг. Коэффициент корреляции между ними составляет 0,980.

 

 

1.4 Исследование регуляции иммунной функции

1.4.1   Неспецифический иммунитет

1.4.1.1 Определение веса органов иммунной системы

Влияние личинок трутней в различных дозировках на вес органов иммунной системы мышей приведено в таблице 3.16.

Таблица 3.16 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на вес органов иммунной системы мышей

Table 3.16 The effect of drone larvae on mice immunity     apparatus’ weight

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Показатель изменения веса селезёнки	Показатель изменения веса тимуса
1	0,0	10	52,7±5,2927	35,4±3,8280
2	1,0	10	56,8±5,5070	37,9±4,2958
3	3,0	10	60,0±8,1721*	39,7±3,1246*
4	5,0	10	59,1±5,3486*	40,9±5,3351**
5	7,0	10	58,2±6,3479	39,8±4,3400*

 

 

1.4.1.2 Исследование фагоцитоза макрофагов

Процент поглощения = (Макрофаги с поглощёнными CRBC / 100 макрофагов) ×100%;

Индекс поглощения = (Общее количество поглощённых CRBC / 100 макрофагов) × 100%.

Влияние личинок трутней в различных дозировках на одноядерные макрофаги мышей приведено в таблице 3.17.

Таблица 3.17 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на процент поглощения индекс поглощения CRBC одноядерными макрофагами в исследовании неспецифического иммунитета

Table 3.17 The effect of drone larvae on phagocytosis of macrophage in the experiment of nonspecific immunity

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Процент поглощения	Индекс поглощения
1	0,0	10	35,5±3,5978	0,411±0,0260
2	1,0	10	41,5±3,9229**	0,509±0,03281**
3	3,0	10	49,7±4,9900**	0,622±0,0598**
4	5,0	10	50,0±3,9721**	0,608±0,0531**
5	7,0	10	45,2±4,9621**	0,551±0,0515**

 

 

 

1.4.2   Клеточный иммунитет

Динитрофторбензол (DNFB) вызывает у мышей гиперчувствительность замедленного типа (DTH)

Степень набухания (%) = (исследуемая сторона – контрольная сторона) / контрольная сторона ×100%.

Влияние личинок трутней в различных дозировках на набухание уха у мышей вследствие гиперчувствительности замедленного типа (DTH) вызванной нанесением динитрофторбензена (DNFB) при исследовании иммунитета на клеточном уровне приведено в таблице 3.18.

Таблица 3.18 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на набухание уха у мышей вследствие гиперчувствительности замедленного типа (DTH).

Table 3.18 The effect of drone larvae on mice, s DTH induced by DNFB in the experiment of Cellular immunity

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Степень набухания (%)
1	0,0	10	77,52±10,66
2	0,25	10	94,15±6,92*
3	0,5	10	98,81±11,90*
4	0,75	10	99,64±15,25
5	1,0	10	104,33±14,16**
6	3,0	10	131,06±23,80**
7	5,0	10	128,49±22,07**
8	7,0	10	114,11±14,18**
9	9,0	10	93,56±9,53
10	11,0	10	84,74±8,71

 

 

 

1.4.3   Испытание гуморальной иммунной функции: метод иммунной реакции на CRBC

Влияние личинок трутней в различных дозировках на гемолизин в сыворотке крови при исследовании гуморального иммунитета приведено в таблице 3.19.

Таблица 3.19 – Влияние личинок трутней в различных дозировках на гемолизин в сыворотке крови при исследовании гуморального иммунитета

Table 3. 19 The effect of drone larvae on blood serum hemolysin of mice’s in the experiment of Humoral immunity

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Значение степени поглощения излучения
1	0,0	10	0,119±0,0055
2	1,0	10	0,1288±0,0274
3	3,0	10	0,1712±0,0428*
4	5,0	10	0.1627±0.0732
5	7,0	10	0.1584±0.0503

Взаимосвязь между различными показателями, полученными в результате проведённых исследовании иммунитета мышей и некоторых других показателей при употреблении личинок трутней в различных дозировках приведена в таблице 3.20. Таблица 3.20 – Анализ взаимосвязи между различными показателями, полученными в результате проведённых исследований иммунитета мышей и некоторых других показателей при употреблении личинок трутней в различных дозировках.

 

Table 3.20 Analysis of all indexes in the experiments of mice immunity

	Уравнение линии тренда	Наилучшая дозировка (г/кг)	Значение коэффициента корреляции r между степенью набухания уха и другими группами
Степень набухания уха	y=-1,4305x2+14,562x+89,068	5,09
Индекс селезёнки	y=-0,3586x2+3,1528x+53,295	4,40	0,990**
Индекс тимуса	y=-0,2162x2+2,1152x+35,603	4,89	0,950**
Процент поглощения	y=-0,8074x2+7,023x+35,47	4,35	0,994**
Индекс поглощения	y=-0,0116x2+0,0995x+0,4166	4,29	0,999**
Гуморальный иммунитет	y=-0,0024x2+0,0226x+0,116	4,71	0,938**

 

 

Сравнение влияния личинок трутней при различных концентрациях на иммунитет приведено на рис. 3.2.

Сравнение тенденций изменения показателей иммунитета при употреблении личинок трутней в различных концентрациях

 

Ось ординат: значение показателя

◆ Степень набухания уха

Процент поглощения

✲ Показатель селезёнки

● Показатель тимуса

■ Гуморальный иммунитет

× Показатель поглощения

 

Рис. 3.2 – График сравнения линий трендов, построенных на основании индексов влияния, полученных исходя из исследований иммунитета мышей.

Fig. 3.2 The comparison of all indexes in mice’ s immunity experiments

Испытание 3.4 демонстрирует, что личинки трутней в разной степени усиливают гуморальный и неспецифический иммунитет подопытных мышей. Они способствуют увеличению веса и объёма главных органов иммунной системы, повышают способность макрофагов к фагоцитозу, способствуют усилению ответной реакции на гиперчувствительность замедленного типа. Заметный эффект достигается уже при малых дозировках. Также заметно воздействие, оказываемое на гуморальный иммунитет. Из графика 3.2 и таблицы 3.20 можно увидеть, что личинки трутней оказывают различное воздействие на показатели, полученные при исследовании трёх видов иммунных систем. Исходя из уравнения линии тренда получено, что разница во влиянии на эти показатели максимальных дозировок также очень велика. Между ними прослеживается чёткая взаимосвязь. Исходя из дозировок, согласно которым проводились испытания, разница в наилучших дозировках обусловлена тем, что дозировки, применяемые в исследовании клеточного иммунитета и дозировки, применяемые в других исследованиях различны. Возможно, что влияние на мышей малых и больших дозировок личинок трутней, по сравнению со средними дозировками имеет большие различия.

 

 

1.5 Исследования, направленные на определение более точной
наилучшей дозировки личинок трутней

Исходя из того, что между показателями, полученными при исследовании иммунитета и показателями, полученными при исследовании сопротивляемости усталости, имеется чёткая взаимосвязь, мы имеем основания полагать, что тенденция изменения какого-либо одного показателя, в некоторой степени может выразить тенденцию изменения других показателей. Одновременно с этим, из приведённого выше анализа мы можем заключить, что данная взаимосвязь усиливается с уменьшением диапазона дозировок. Поэтому, для получения более точных данных о дозировках, и сокращения количества используемых животных необходимо сократить диапазон дозировок и провести более детальные исследования по какому-либо из показателей.

 

 

1.5.1   Испытание плаванием

Анализ данных полученных вследствие проведения испытания на определение дозировки личинок трутней основанного на максимальном времени плавания мыши приведён в таблице 3.21.

Таблица 3.21 – Испытание на определение дозировки личинок трутней основанного на максимальном времени плавания мыши.

Table 3.21 Datum of mice’ s swim in experiment of finding the best dosage for mice’s anti-fatigue

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Время плавания (сек.)
1	2,0	10	2557,2±323,55
2	2,5	10	2859,0±447,86
3	3,0	10	3217,5±599,97
4	3,5	10	3224,1±458,73
5	4,0	10	3104,2±394,06
6	4,5	10	2733,3±387,05
7	5,0	10	2704,1±420,54
8	5,5	10	2677,7±348,29

 

 

1.5.2   Клеточный иммунитет

Динитрофторбензол (DNFB) вызывает у мышей гиперчувствительность замедленного типа (DTH)

Анализ данных полученных в результате испытаний на определение наилучшей дозировки личинок трутней исходя из их влияния на степень набухания уха в исследовании клеточного иммунитета.

Таблица 3.22 – Испытание на определение наилучшей дозировки личинок трутней исходя из их влияния на степень набухания уха в исследовании клеточного иммунитета

Table 3.22 Datum of DTH in experiment of finding the best dosage for mice’s immunity

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (особей)	Степень набухания (%)
1	2,0	10	113,64±10,07
2	2,5	10	132,17±21,41
3	3,0	10	156,00±21,04
4	3,5	10	146,61±23,98
5	4,0	10	140,22±26,27
6	4,5	10	135,3±25,22
7	5,0	10	128,12±31,82
8	5,5	10	108,05±10,93

График тенденции изменения данных полученных в результате испытания по определению наилучшей дозировки личинок трутней изображён на рис. 3.3.

 

 

Испытание наилучшей дозировки

Ось абсцисс: Дозировка (г/кг)

Ось ординат (слева): Время плавания (сек.)

Ось ординат (справа): Степень набухания уха (%)

■ Степень набухания уха

◆ Продолжительность плавания

 

Рис. 3.3 – График показателей, полученных в результате испытания по определению наилучшей дозировки личинок трутней

Fig. 3.3 Comparison of datum in the experiment of swim and that of DTH after administering drone larvae

Из графика 3.3 получаем, что уравнение линии тренда времени плавания из исследования сопротивляемости усталости и наилучшая дозировка соответственно имеют вид: y=-11,808x²+85,514x-6,6195; 3,65 г/кг. Уравнение линии тренда степени набухания уха из исследования иммунитета и наилучшая дозировка соответственно имеют вид: y=-173,49x²+1265,4x+806,91, 3,62 г/кг. Коэффициент корреляции r между ними составляет 0,883. Это говорит о том, что наиболее эффективная дозировка личинок трутней для повышения сопротивления усталости у мышей и дозировка оказывающая наилучший эффект на иммунитет примерно совпадают. Эта информация является дополнительной опорой, для более детального рассмотрения механизмов действия личинок трутней. Одновременно с этим, исходя из рис.3.1 и рис. 3.2, мы имеем основание утверждать, что эта дозировка является идеальной в плане наибольшей эффективности для повышения устойчивости к усталости и усилению иммунитета.

 

 

1.6 Поиск наилучшего соотношения личинок трутней и
лекарства китайской медицины.

1.6.1   Испытание плаванием

Результаты испытания по поиску наилучшего соотношения лекарства китайской медицины и личинок трутней, посредством определения влияния образца на продолжительность плавания мышей приведены в таблице 3.23.

Таблица 3.23 – Влияние различного соотношения лекарства китайской медицины и личинок трутней на время плавания мышей

Table 3.23 The effect of drone larvae and Chinese herbal medicine mixture made with different ratio in the experiment of mice, s swim

Номер группы	Процентное содержание лекарства китайской медицины (%)	Количество животных (шт.)	Продолжительность плавания (сек.)
1	0	10	1505,0±78,20
2	5	10	1510,2±63,51
3	10	10	1525,2±98,54
4	15	10	1535,3±87,42
5	20	10	1816,5±117,48**
6	25	10	1817,3±118,43**
7	30	10	1812,8±92,97**
8	35	10	1789,7±115,78**
9	50	10	1721,9±125,78**

 

 

1.6.2   Исследование клеточного иммунитета

Динитрофторбензол (DNFB) вызывает у мышей гиперчувствительность замедленного типа (DTH)

Результаты испытания по поиску наилучшего соотношения лекарств китайской медицины и личинок трутней, посредством определения влияния образца на клеточный иммунитет мышей приведены в таблице 3.24.

Таблица 3.24 – Влияние различного соотношения компонентов в смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины на клеточный иммунитет мышей

Table 3.24 The effect of drone larvae and Chinese herbal medicine mixture made with different ratio in the experiment of DTH

Номер группы	Процентное содержание лекарства китайской медицины (%)	Количество животных (шт.)	Степень набухания (%)
1	0	10	109,24±11,39
2	5	L0	111,3±17,75
3	10	L0	107,5±8,30
4	15	10	108,6±13,36
5	20	10	127,3±14,95*
6	25	10	133,3±14,96**
7	30	10	142,0±23,26**
8	35	10	121,1±18,26
9	50	10	113,6±21,98

График влияния различных соотношений компонентов в смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины на степень набухания уха в следствии клеточной иммунной реакции и продолжительность плавания мышей изображён на рис. 3.4.

Испытание, направленное на определение наилучшего соотношения между личинками трутней и лекарством китайской медицины

Испытание, направленное на определение наилучшего соотношения между личинками трутней и лекарством китайской медицины

Ось абсцисс: Содержание лекарства китайской медицины (%)

Ось ординат (слева): Время плавания (сек.)

Ось ординат (справа): Степень набухания уха (%)

■ Продолжительность плавания

◆ Степень набухания

График влияния различных соотношений компонентов в смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины на степень набухания уха в следствии клеточной иммунной реакции и продолжительность плавания мышей

Fig. 3.4 The experiment for finding the best ratio of drone larvae and Chinese herbal medicine

Из таблиц 3.23 и 3.24 можно увидеть, что лекарство китайской медицины, в зависимости от его доли в смеси, может заметно усилить влияние личинок трутней на продолжительность плавания мышей и их клеточный иммунитет. Наиболее оптимальная доля лекарства китайской медицины в смеси, обеспечивающая наилучшую продолжительность плавания мышей находится в диапазоне от 20% до 50%. Для клеточного иммунитета данное значение находится в пределах от 20% до 30%. Полученные из графика 3.4 уравнение тренда времени плавания и процент лекарства китайской медицины, при котором продолжительность плавания максимальна, соответственно имеют вид: y=-0,2794x²+20,236x+1429,5; 36,2%. Уравнение тренда гиперчувствительности замедленного типа и процент лекарства китайской медицины, при котором продолжительность плавания максимальна, соответственно имеют вид: y=-0,0294x²+1,7469x+102,03; 29,7%. Коэффициент корреляции между ними составляет 0,857. Наличие взаимосвязи между ними очевидно. Из таблиц 3.23 и 3.24, а также графика 3.4 можно увидеть, что при доле лекарства китайской медицины, находящейся в диапазоне от 20% до 30%, значения времени плавания и степени набухания находятся на большом расстоянии от кривой. Их числовые значения довольно высоки. Для определения причины этого явления необходимо проводить более глубокие исследования. Основываясь на этом, для производства препарата в реальных условиях, в качестве наиболее оптимальной доли лекарства китайской медицины в смеси принимается значение 30%.

 

 

1.7 Исследование наилучшей дозировки смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины
(при доле лекарства китайской медицины равной 30%)

1.7.1   Испытание плаванием

Исследование на определение наилучшей дозировки смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины (при доле лекарства китайской медицины равной 30%) влияющей на время плавания мышей, приведено в таблице 3.25.

Таблица 3.25 – Исследование на определение наилучшей дозировки смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины (при доле лекарства китайской медицины равной 30%) влияющей на время плавания мышей

Table 3.25 Swimming time of mice after being administered the mixture of drone larvae and Chinese herbal medicine (30%)

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Время плавания (сек.)
1	1,5	10	2104,55±456,24
2	2,0	10	2177,15±389,77
3	2,5	10	2318,56±406,33
4	3,0	10	2539,64±356,82
5	3,5	10	2527,38±377,11
6	4,0	10	2259,74±395,26
7	4,5	10	1987,53±425,31
8	5,0	10	1901,47±463,85

 

 

1.7.2   Клеточный иммунитет

Динитрофторбензол (DNFB) вызывает у мышей гиперчувствительность замедленного типа (DTH)

Результаты исследований по определению концентрации смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины (при доле лекарства китайской медицины равной 30%) при которой влияние на степень набухания ушей мыши максимально приведены в таблице 3.26.

Таблица 3.26 – Исследование клеточного иммунитета мышей направленного на определение наилучшей дозировки смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины (при доле лекарства китайской медицины равной 30%)

Table 3.26 Datum of mice’ s DTH after administering the mixture of drone larvae and Chinese herbal medicine (30%)

Номер группы	Дозировка (г/кг)	Количество животных (шт.)	Степень набухания (%)
1	1,5	10	103,41±11,99
2	2,0	10	109,18±10,97
3	2,5	10	115,36±13,94
4	3,0	10	139,44±20,44
5	3,5	10	140,10±14,68
6	4,0	10	113,98±11,00
7	4,5	10	91,33±9,25
8	5,0	10	91,09±10,97

Результаты сравнения данных, полученных в результате исследований, направленных на определение наилучшей концентрации смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины (при доле лекарства китайской медицины, равной 30%).

 

Наилучшая концентрация смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины

Ось абсцисс: Дозировка (г/кг)

Ось ординат (слева): Время плавания (сек.)

Ось ординат (справа): Степень набухания уха (%)

■ Продолжительность плавания

◆ Степень набухания

 

Рис. 3.5 – Исследование, направленное на определение наилучшей концентрации смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины (при доле лекарства китайской медицины равной 30%).

Fig. 3.5 Comparison in experiments for finding the best dosage of drone larvae and Chinese herbal medicine mixture containing 30 percent Chinese herbal medicine

Полученные из рис. 3.5 уравнение линии тренда испытания плаванием и дозировка, оказывающей наибольшее влияние на продолжительность плавания мышей соответственно имеют вид: y=-163,39x²+1001,1x+913,65; 3,06 г/кг. Уравнение линии тренда клеточного иммунитета (гиперчувствительность замедленного типа) и дозировка, при которой влияние на степень опухания ушей мыши – максимально, соответственно имеют вид:

y=-12,469x²+76,789x+11,494; 3,08 г/кг. Из графиков 3.3 и 3.5, можно увидеть, что использование смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины, по сравнению с применением чистых личинок трутней, позволило достичь идентичного результата при сокращении дозировки. Кроме того, как в испытании плаванием, так и в испытании клеточного иммунитета гиперчувствительностью замедленного типа, эффективность использования смеси личинок трутней с лекарством китайской медицины заметно выше, чем при использовании чистых личинок трутней. Также, согласно графикам 3.1 и 3.2, можно легко сделать вывод о том, что использование смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины значительно эффективнее в плане увеличения сопротивления усталости повышению иммунитета по сравнению с применением личинок трутней отдельно. Таким образом, удалось осуществить взаимное дополнение этих компонентов в смеси. Из опыта 3.2 мы узнали, что смесь личинок трутней и лекарства китайской медицины в сравнении с использованием чистых личинок трутней не имеет явных отличий в плане острой и генетической токсичности. Это говорит о том, что наличие взаимного дополнения между личинками трутней и лекарством китайской медицины является довольно обоснованным с научной точки зрения. Механизм взаимного повышения эффективности этих компонентов, вследствие их совместного использования требует более тщательных исследований. Однако, это, прежде всего, неразрывно связано с тем, что выбранный лекарство китайской медицины является очень ценным и знаменитым лекарством для поддержания здоровья организма и содержит множество физиологически активных веществ.

 

 

Краткий итог

Личинки трутней обладают такими свойствами, как повышение сопротивления к усталости и регулирования иммунной функции организма, а также оказывают довольно хорошее воздействие на большинство факторов, влияющих на сопротивление усталости и регулирование иммунной функции. Хотя идеальные дозировки, полученные на основании полученных показателей различных исследований довольно различны, однако имеется тенденция их явной зависимости, а разброс наилучших дозировок довольно сосредоточен. Данная разница заключается, прежде всего, в том, что личинки трутней в разной степени влияют на улучшение различных функций организма. Также этот разброс вызван тем, что по причине различных дозировок, используемых в исследованиях, при проведении их анализа, факторы, влияющие на появление погрешностей, были также различны. Однако, результат множества испытаний показал, что идеальной дозировкой личинок трутней как для усиления иммунитета, так и для повышения сопротивления усталости является дозировка примерно равная 4 г/кг, а идеальная дозировка смеси личинок трутней с лекарством китайской медицины около 3 г/кг.

Из графиков 3.3 и 3.4 можно увидеть, что между показателями повышения сопротивления усталости и усиления иммунитета, как вследствие использования личинок трутней, так и вследствие использования смеси личинок трутней с компонентом китайской медицины имеются крайне очевидная взаимосвязь. Поэтому, мы сделали вывод о том, что личинки трутней и смесь личинок трутней с лекарством китайской медицины посредством укрепления иммунитета организма способны усилить его сопротивление усталости. Хотя, это конечно требует проведения более тщательных исследований для подтверждения. Отсюда мы можем определить то, что личинки трутней являются идеальным средством для поддержания здоровья организма.

В настоящее время уже известно то, что организм имеет три вида иммунитета: неспецифический иммунитет, клеточный иммунитет и гуморальный иммунитет.

Вещественным основанием этих трёх видов иммунитета в основном являются комплексы белков и их незаменимых аминокислот. Одновременно с этим, некоторые другие необходимые питательные и биологически активные вещества также имеют определённую способность к усилению иммунной функции организма. Вещества, содержащиеся в большом количестве внутри личинок трутней, оказывают положительное воздействие на способность макрофагов к синтезу микротрубочек и микрофиламентов, а также усилению их способности к перемещению. Одновременно с этим, ненасыщенные жирные кислоты способны посредством усиления текучести мембран увеличить вероятность взаимодействия мембранных рецепторов с красными кровяными тельцами петуха, и как следствие, усилить способность макрофагов к фагоцитозу, оказывая тем самым положительное воздействие на неспецифический иммунитет мышей. Одновременно с усилением способности макрофагов к фагоцитозу, личинки трутней также оказывают положительное воздействие на улучшение усваивания антигенов при клеточном и гуморальном иммунитетах. Содержащиеся в личинках трутней ювенильный гормон и экдизон с высокой степенью активности, посредством стимулирования синтеза кольцевой аденозинмонофосфорной кислоты способствуют нормализации структуры спиральных белков, и как следствие, обеспечивая нормальное строение молекул MHC второго и третьего класса. Также они способствуют правильному прохождению процесса доставки антигенов. В дополнение к этому, личинки трутней богаты белком, аминокислотами и другими веществами способными стимулировать развитие и рост лимфатических органов, размножение лимфатических клеток, а также деление и синтез лимфокинов. Как следствие, усиливая эффективность при гиперчувствительности замедленного типа вызванной DNFB. В плане гуморального иммунитета, личинки трутней содержат в себе большое количество белков, аминокислот и других веществ, которые способны не только стимулировать размножение лимфатических клеток (в основном клеток типа T и B), но и также обеспечивают отличную материальную базу для производства антител. Одновременно с этим, личинки трутней богаты флаванонами и другими веществами, которые способны усилить иммунную функцию организма через нервную систему и систему внутренней секреции. Исходя из этого, после антигенной стимуляции, усиливается способность реактивных иммунных клеток производить соответствующие антитела, что приводит к значительному увеличению количества антител к CRBC у мышей.

Множество компонентов содержащихся в личинках трутней, при использовании их по отдельности уже имеют множество превосходных функций. Среди них витамины C, E, A, селен и соединения на основе селена. Все эти компоненты позволяют эффективно избавляться от свободных радикалов, повышать иммунитет, оказывать противораковое и антивозрастное действия. Содержащиеся в личинках трутней флавоноиды способны не только избавляться от свободных радикалов, но и непосредственно сдерживать рост раковых клеток, а также обеспечивать биохимическую защиту клеток от негативного воздействия канцерогенных веществ. Органический германий, посредством усиления иммунитета организма, его очистки от свободных радикалов и антимутационного действия способен оказывать действие, направленное на сдерживание развития рака. Эти активные вещества, содержащиеся в личинках трутней не только лишь простые соединения, но они содержаться в организме личинки трутня в комбинации с другими активными веществами, а их пропорциональное соотношение в этой комбинации наиболее оптимально. Кроме того, эти соединения при взаимодействии между собой способны взаимно усиливать друг друга. Именно по перечисленным выше причинам, личинки трутней имеют настолько хорошее воздействие на организм человек. Кроме того, множество проведённых исследований подтверждают способность иммунных систем ликвидировать мутировавшие клетки, и, как следствие, имеют антимутационное и противоопухолевое действие. Поэтому мы имеем основания полагать, что личинки трутней также обладают омолаживающим и противораковым действием.

Подытоживая вышеизложенное, личинки трутней – это превосходный питательный компонент для поддержания здоровья организма. Использование смеси личинок трутней и лекарства китайской медицины для усиления сопротивляемости усталости и улучшения иммунитета заметно превосходит по эффективности использование личинок трутней в чистом виде.

 

 

Используемая литература

• Луо Шанхуа. Общая обстановка и перспективы развития исследований и разработок в области личинок и куколок медоносных пчёл [J]. Пчеловодство Китая, 1997, 4: 23.
• Ян Жуйфу и др. Куколки как питательное сокровище, требующее проведения разработок [J]. Пчеловодческая наука и техника, 1994, 2:20.
• Го Шичун. Поиск применения куколок – источника биопротеина [J]. Пчеловодческая наука и техника, 2000, 2:17.
• Чжан Фусин и др. Современное пчеловодство и производство [M]. Издательство сельского хозяйства Китая, 1998, 11:500–512.
• Чэнь Шэнлу и др. Апиология Китая [M]. Издательство сельского хозяйства Китая, 2001, 7:536–539, 731, 748–758.
• Е Чжэншэнь и др. Технология глубокой переработки продукции пчеловодства [M]. Издательство лёгкой промышленности Китая, 2003, 4:689–406.
• Юань Цзелян и др. Переработка продукции пчеловодства и здравоохранение [M]. Издательство научной и технической литературы, 2001, 1:295–314.
• Хун Цзянь. Переработка продукции пчеловодства и здравоохранение [J]. Пчеловодство Китая, 2002, 3:17.
• Чэнь Шанфа. Экономическая ценность и перспективы развития куколок трутней [J]. Пчеловодство Китая, 1990:25–26.
• Юань Яодун и др. Справочник по пчеловодству [M]. Издательство аграрного университета Китая, 1999, 6:333–346.
• HAYDAK, M. K: Changes with age in weight and nitrogen content of honeybee[M]. Bee World,1959, No. 5.
• Цяо Янькунь. Состав и использование куколок медоносной пчелы [J]. Технологии пчеловодства, 1993, 1:31.
• Ян Жуйфу. Куколки как питательное сокровище, требующее проведения разработок [J]. Пчеловодческая наука и техника, 1994, 4:24–25.
• Ху Шэнхун и др. Извлечение высокоактивных компонентов содержащихся в куколках пчёл, их исследование и анализ. Извлечение соединений флавоноидов и определение их характеристик [J]. Пчеловодство Китая, 2000, 6:7–9.
• Дун Сюэцзюнь и др. Исследование содержания аминокислот в куколках пчёл [J]. Аминокислоты и биоресурсы, 2000, 22(1):14–15.
• Цзян Юэин и др. Разработка и использование новых источников белка [J]. Продукты питания Китая, 1987, 1:23.
• Сун Синьфан и др. Производство, переработка и использование продукции пчеловодства [M]. Издательство науки и техники провинции Шаньдун, 1988:389–391.
• Чжу Юньцзяо. Использование и переработка личинок и куколок медоносных пчёл [J]. Наука и техника пчеловодства, 1995, 4:28–29.
• Сюэ Юн. Разработки и использование личинок и куколок медоносных пчёл [J]. Наука и техника пчеловодства, 1995.
• Ци Юсян и Цай Чжаолун. Разработки и использование куколок трутней. Журнал о медоносных пчёлах.
• Фан Чжу. Использование личинок медоносных пчёл [J]. Пчеловодство Китая, 1985, 1:2.
• Чэнь Миншэн. Краткий анализ лекарственной ценности куколок пчёл [J]. Пчеловодство Китая, 1996, 2:21.
• The hive products food health and beauty [M]. Apimondia publishing house ,1975.
• Чжан Гуйсян. Питательная ценность продукции медоносных пчёл. Современная обстановка в исследованиях и разработках [J]. Исследование и разработка продуктов питания, 2002, 2:43-45.
• Шэнь Пинжуй и др. Питательные вещества, содержащиеся в куколках пчёл и их сравнение с несколькими питательными продуктами питания [J]. Трофология, 1991, 9.
• Чжан Цзян и др. Исследование, анализ и сравнение веществ содержащихся в личинках медоносных пчёл и личинках в форме сухого порошка [J]. Журнал о медоносных пчёлах, 1995, 10:6–7.
• Лю Цичжи. Современная обстановка и перспективы использования и развития продукции пчеловодства в нашей стране. [J]. Знания о насекомых, 1998:7.
• Синь Лиэ. Активное и антиоксидантное действие супероксидлипидазы в некоторых продуктах пчеловодства [J]. Журнал о пчеловодстве, 2000,8:6-7.
• Лю Кэву и др. Анализ содержания флавоноиды, микро- и макроэлементов в некоторых продуктах пчеловодства. [J]. Журнал о пчеловодстве, 2001,3-4.
• Жи Фэнмэй. Прогресс в исследованиях биологической активности флавоноидов и механизмов их воздействия на организм. [J]. Трофология, 1999, 8:11–13.
• Чжан Дйцюань и др. Общие положения в применении и исследованиях биофлавоноидов [J]. Пищевая и бродильная промышленность, 1999, 25(6):52–57.
• Чжао Цзин и др. Начальное исследование содержания холестерина в личинках пчелиной матки [J]. Пчеловодств Китая, 1995, 1:7–8.
• Учебные материалы, составленные Мяо Сяоцином. Биология медоносных пчёл. Глава 6. Анатомия тканей медоносной пчелы и их биологическое развитие.
• Casson, Z. Honeybees for fish bait. [M] Gl. Bee Cult, 1966, 94(12):748~749.
• Gary, N. E., R. W. Ficken, and R. C. Stein. Honeybee larvae (Apis mellifera L.) for bird food|M]. Avicult. Mag,1861, 67:27-32.
• Guss, S. B. Bee larvae as food for caged birds[J]. Am. Bee J,1967,107(2):62.
• Ху Фулян и др. Влияние личинок и куколок медоносных пчёл на сопротивляемость белых мышей стрессу [J]. Наука и техника пчеловодства, 1997,2:6, 9.
• Ху Фулян и др. Влияние личинок и куколок рабочей пчелы на способность организма мышей к преобразованию T-лимфатических клеток. [J]. Журнал о медоносных пчёлах, 1997:3-4.
• Ху Фулян и др. Исследование действия личинок и трутней медоносной пчелы на сдерживание развития рака S180 у мышей. [J]. Пчеловодство Китая, 1997, 4:10-11.
• Чжоу Жуйхуа и др. Исследование механизмов воздействия личинок пчелиной матки на иммунитет мышей. [J] Трофология, 1999, 11:11–14.
• Методы проверки санитарных качеств пищевой продукции, изданные министерством здравоохранения КНР [M]. Издательство стандартов Китая. Напечатано в типографии Циньхуандао, 1996,9:17.
• Чжэн Цзяньсянь. Функциональные продукты питания (Том 3) [M]. Издательство лёгкой промышленности Китая, 2002, 1:26–46, 83–132, 306–369.
• Методы проверки и порядок научной оценки функциональных свойств пищевых продуктов для поддержания здоровья. [M]. Инспекция по санитарному надзору за продуктами питания министерства здравоохранения, 2003.
• Шао Юцюань и др. Отчёт об исследовании острой токсичности препарата – порошка личинок трутней [J]. Наука и технологии пчеловодства, 1992, 1:14.
• Шэнь Пинжуй и др. Эффективность питательных компонентов, содержащихся в личинках пчелиной матки. Их разработка и использование в качестве пищевых продуктов. [J]. Трофология, 1993, 3:63–64.
• Ван Цзиньюн и др. Терапия по методам китайском медицины с использованием продуктов пчеловодства. [M]. Издательство Шэньян, 2001, 7:770–773,971–982.
• У Суйвэнь и др. Экспериментальные исследования воздействия питательной жидкости на основе прополиса по увеличению сопротивляемости усталости. [J]. Пчеловодство Китая, 1997, 6:9–10.
• Ван Суйлоу и др. Биотехнологии продуктов питания [M]. Издательство Хайян, 1992, 2:181–199.
• Цзэн Чжицзян и др. Продукция пчеловодства и здоровье человека [M]. Издательство сельского хозяйства г. Пекин, 1993.
• Чэнь Шиби и др. Использование, обработка и сохранение свежести продукции пчеловодства [M]. Издательство популяризации науки, 1988.
• Пань Цзяньго и др. Перспективы применения высоких технологий современных продуктов питания в сфере обработки продукции пчеловодства [J]. Пчеловодство Китая, 2001, 3:30–31.
• Чжан Шиянь. Технология производства куколок трутней [J]. Журнал о медоносных пчёлах, 2002, 2:13.
• Ян Миньжуй и др. Новые методы сохранения свежести личинок и куколок медоносных пчёл [J]. Пчеловодство Китая, 1995, 3:23.
• Чжоу Сянхуэй и др. Изучение развития и исследований в области продуктов питания на основе насекомых [J]. Наука и техника пищевой промышленности, 2001, 5(22):84–85.
• Bodenbeimer F. S. Insect as Human Food: a Chapter of the biology of Man[M]. The Hague: W. Junk, 1951.
• Gary, N. E. Mass production of honeybee larvae [M]. Gl. Bee Cult, 1961,89(9): 550-552,569.
• Hocking, B., and F. Matsumura. Bee brood as food. Bee Word[J].1960, 41 (5): 113–120.
• Irvine, F. R. Indigenous African methods of beekeeping[J]. Bee World, 1957,38(5):113-128.
• Чэнь Шумин и др. Влияние спиртовой вытяжки из пантов на содержание гемолизина в организме белых мышей [J]. Сельскохозяйственная наука Шаньси, 2000,28(1): 85–86.
• Ху Юэцзюань. Методология проведения экспериментального изучения фармакологических свойств лекарств китайской медицины. [M]. Издательство науки и техники, г. Шанхай, 1991:155, 158.
• Кан Бинси. Методология исследования фармакологических свойств лекарств китайской медицины [M]. Издательство народной гигиены, 1993, 750–780.
• Marshall LA, Johnston PV. The effect of dietary a-linolenic acid on phospholipid fatty acid profiles of immunocompetent cell population [J]. Lipids 1983,18: 737.
• Чэн Юань. Питательные и иммунные функции [J]. Том иностранной медицинской санитарии, 1997, 24(4).
• Лю Цайюнь. Производство растворимых препаратов на основе куколок трутней для поддержания здоровья пожилых людей [J]. Наука и техника пчеловодства, 2003, 4:2–3.
• Ли Минь и др. Изучение механизмов воздействия питательных веществ в микстурах на основе лекарств китайской медицины на сопротивление усталости мышей [J]. Журнал профилактической медицины имени освободительной армии, 2002, 12:401–402.
• Го Куйлян и др. Исследование действия жирных спиртов с длинной цепочкой на сопротивление усталости мышей [J]. Вестник военного медицинского университета имени Генри Нормана Бетьюна, 2003,3: 17–18.
• Вэн Цзин и др. Исследования и опыты, направленные на определение влияния ильмака на содержание молочной кислоты, мочевины и лактодегидрогеназы в крови мышей [J]. Вестник ассоциации университетов Пекина, 1994, 1:4–5.
• Вэн Цзин и др. Наблюдение за действием лекарств китайской медицины по повышению сопротивления усталости посредством определения закономерностей в изменениях содержания мочевины в крови мышей после выполнения ими физической работы. [J]. Вестник ассоциации университетов Пекина, 1998, 10:191–194.
• Ся Гуйлань и др. Исследования и опыты, направленные на определение влияния герпестиса на сопротивление усталости мышей [J]. Китайский журнал по патофизиологии, 1998, 14(2):182, 186.
• King J. A routine method for the estimation of lactic dehydrogenase activity[J], 1959,16:265.
• Haralambie Qea/. Serum urea and amino nitrogen change c switch exercise duration [JJ.Europ Jappl Physiol,1976,36:39.
• Marshall LA, Johnston PV. The effect of dietary a-linolenic acid on phospholipid fatty acid profiles of immunocompetent cell population[J]. Lipids 1983,18:737.
• Цэнь Сяобо и др. Исследование влияния перги на иммунитет мышей [J]. Общественная гигиена Китая, 1997, 13:414–415.
• У Юцин и др. Влияние сложных пероральных жидкостей с содержанием пчелиных компонентов на иммунитет старых мышей и способность их организма к антиоксидации. [J]. Научный вестник медицинского института Сюйчжоу, 2003, 23(4):308–310.

 

 

Приложение: Информация о кормлении и содержании подопытных мышей

• Окружающая среда, в которой производится кормление: температура 23±1°C, влажность 40-70%. Применяется коробка для мышей из нетоксичного пластика, клетка с прутьями из нержавеющей стали и стальным каркасом. В качестве подстилки используется щепа из широколиственных пород дерева. После пребывания материала подстилки на солнце, он опрыскивается 0,1%-м раствором бромогерамина либо 3%-м раствором лизола для дезинфецирования. После этого снова выставляется на солнце для высушивания и откладывается на хранение.
• Корм и питьевая вода
  • Корм (feed): «Гранулированный корм для разведения крыс и мышей» производства ООО «Корма КЭАОСЕЛИ», г. Пекин (BEIJING KEAOXIELI FEED.CO.,LTD)

Регистрационный номер: ЦзинСы(Пэй)Цзы (JingSi(Pei)Zi) № 238; Лицензия на продукцию: ЦзинДунСюЦзы (JingDongXuZi) (2000) № 015; Продукция соответствует требования санитарных норм для кормов.

Состав корма: кукуруза, рыбная мука, соевый шрот, сухое молоко, лизин, кальций фосфорнокислый двузамещённый 2-водный, сухие дрожжи, каменная (горная) мука, растительное масло, пищевая соль, сульфат меди, фосфат цинка, железный купорос, сульфат марганца, витамин А, витамин D3, витамин E, витамин B12 и другие.

• Питьевая вода (drinking water): холодная кипячёная вода. Смена воды производится каждые два дня.

• Управление процессом кормления
  • Кормление: корм добавляется каждый день при проведении испытаний. Обеспечение кормления в полном объёме.
  • Очистка, гигиена и дезинфекция: подстилка меняется раз в 3 дня. Дезинфекция производится раз в месяц методом опрыскивания 0,1%-м раствором бромогерамина. Дезинфекция выполняется на открытом воздухе 3%-м раствором лизола. Клетки с мышами опрыскиваются раствором надуксусной кислоты (0,2%) для дезинфекции 1 раз за каждый цикл проводимых исследований. Все принадлежности для клеток и посуда для корма при каждом новом цикле исследований замачивается на 30 минут в 0,2%-м растворе надуксусной кислоты. Все другие принадлежности для мышей дезинфицируются перед их использованием.

 

 

 

Благодарность

Данная диссертация была выполнена под чутким руководством преподавателя Мяо Сяоцина, им же была выполнена вычитка черновых материалов. Настоящим, имею честь выразить ему свою искреннюю благодарность! В процессе обучения мой учитель неустанно наставлял меня и проявлял всестороннюю заботу, чего я в жизни не забуду. Внимательный подход моего наставника и его неустанное отношение к работе принесли мне огромную пользу. Мой учитель будет всегда оставаться для меня примером в процессе всего моего обучения. Моя матушка-наставница – преподаватель Ву Чженьхун не только мотивировала и направляла меня в процессе проведения исследований, но и воспитывала меня как человека. Настоящим я из глубины души выражаю ей свою благодарность.

В процессе проведения исследований я получил много помощи и большую поддержку от госпожи Чэнь Чанли и господина Линь Луншэна. Господин Мяо Сяомин помог мне с изготовлением множества различных принадлежностей, необходимых для проведения исследований. Настоящим я выражаю им свою благодарность! В процессе проведения исследований, я также получил значительную поддержку от магистра центра биотехнологий – Ван Биня. Настоящим также выражаю ему свою благодарность. Спасибо доктору Вану Чжухуну, за оказанную им помощь. Выражаю благодарность своему товарищу по учёбе – Фань Сяохуа за его помощь, а также лаборантам и лаборанткам за их понимание и поддержку.

В процессе написания данной работы, я также получил помощь и поддержку от учителя Ван Цзяньдина, учителя Чжан Цикана, профессора Су Жуна, учителя Фу Чжунминя, госпожи Мяо Сунцзы и госпожи Лю Цайчжень. Настоящим также выражаю им всем свою благодарность.

 

Фуцзяньский университет НУНЛИНЬ. Магистерская диссертация. Исследование функциональной активности личинок трутней. Ду Инган и Мяо Сяоцин.

Фуцзяньский университет НУНЛИНЬ. Магистерская диссертация. Исследование функциональной активности личинок трутней. Ду Инган и Мяо Сяоцин. Часть 2.