primenenie-trutnevogo-rasploda-6

ПЯТИГОРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ

Диссертация
на соискание учёной степени
Автор:

КЛИШИНА ИННА ИВАНОВНА
ВЛИЯНИЕ ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА
НА АКТИВНОСТЬ ФАКТОРОВ
НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ
И ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ
ПРИ ОСТРОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

 

Часть II.

Глава 6.
СРАВНИТЕЛЫЮЕ ВЛИЯНИЕ
РАЗЛИЧНЫХ ПРОДУКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА
И ОФИЦИАЛЬНОГО ГЕПАТОПРОТЕКТОРА
НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ
И НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ
ПРИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

6.1. ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ

Поскольку результаты, приведенные в предыдущих главах, объективно свидетельствуют о выраженном гепатопротекторном действии трутневого расплода и его активирующем действием на клеточные и гуморальные факторы естественного иммунитета в условиях острой токсической гепатопатии, закономерно было бы сравнить это действие с действием других часто применяемых в медицинской и диетологической практике продуктов пчеловодства — прополисом, апилаком, а также официальным гепатопротектором — лив-52. В этой связи проведены опыты по изучению сравнительного влияния официальных препаратов, прополиса и апилака, трутневого расплода в форме гомогената и лиофилизата и лив-52 на показатели функционального состояния печени и активность факторов неспецифической резистентности при тетрахлорметановой интоксикации. Выбор препаратов определялся тем, что прополис обладает гепатозащитной активностью [93], а маточное молочко имеет схожие с трутневым расплодом физико-химические свойства и качественный состав [9, 55, 66,67,80].
Результаты этих опытов представлены в таблице 22 и на рис 7.
Таблица 22

Влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок, прополиса, апилака, лив-52 на активность аланинаминотрансферазы и щелочной фосфатазы в условиях тетрахлорметановой интоксикации

 

Группа АЛТ, мккат/л ЩФ, мккат/л
п/п животных М±ш Р М±ш Р
1 2 3 4 5 6
1 Интактные животные, п=8 0,51±0,01 1,26±0,05
2 Животные с СС14

интоксикацией (контроль), п=8

1,57±0,03 Р2.1<0,001 2,71±0,06 Р2.,<0,001
3 Животные, получившие ГТЛ 50 мг/кг и СС14, п=8 1,38±0,04 Р3.2<0,001 Р3.1 <0,001 2,12±0,05 Рз-2<0,001

Р3., <0,001

4 Животные, получившие ГТЛ 200 мг/кг и СС14, п=8 0,62±0,01 Р4.2<0,001 Р4.1>0,05 Р4-: .0,001 1,22±0,05 Р4_2<0,001

Р4.1>0,05

Р4.3<0,001

5 Животные, получившие ЛТЛ 50 мг/кг и СС14, п=8 0,66±0,02 Р5-2<0,001 Р5.,<0,001 Р5-з<0,001 Р5.4>0,05 1,35±0,04 р5.2<0,001 Р5_1>0,05 Р5-з<0,001 Р5-4>0,05
6 Животные, получившие прополис 50 мг/кг и СС14> п=8 0,75±0,02 Р6.2<0,001 Р6.!<0,001 Р6-з<0,001 Р6.4<0,001 Р6-5<0,02 1,27±0,05 Р6.2<0,001 Р6-1>0,05

Р6-з<0,001

Р6-4>0,05

Р6-5>0,05

7 Животные, получившие апилак 50 мг/кг и СС14 п=8 0,92±0,02 Р7.2<0,001 Р7-1<0,001 Р7-3<0,001 Р7-4<0,001 Р7.5<0,001 Р7-б<0,001 1,57+0,05 Р7.2<0,001

Р7.!<0,01

Р7_з<0,001

Р7.4<0,01

Р7.5<0,05

Р7-б<0,05

 

1 2 3 4 5 6
8 Животные, 0,88±0,02 Р8.2<0,001 1,24±0,05 Р82<0,001
получившие Р8-.<0,001 Р8-1>0,05
лив-52 50 Р8-з<0,001 Р8-з<0,001
мг/кг и ССЦ Р8.4<0,001 Р8-4>0,05
п=8 Р8-5<0,001 Р8-5>0,05
Р8-б<0,01 Р8-б>0,05
Р8-7>0,05 Р8-7<0,01

Примечание: п — количество животных;
Р — достоверность различий между группами.

Как свидетельствуют результаты опытов, выраженность гепатозащитного действия в разных опытных сериях оказалась различной и зависела от процента снижения гипертрансаминаземии и активности щелочной фосфатазы.
Профилактическое введение ГТЛ в дозах 50 и 200 мг/кг снизило активность АЛТ относительно контрольных показателей на 12% (р<0,001) и 60% (р<0,001), ЛТЛ в дозе 50 — на 58% (р<0,001), а введение прополиса, апилака, лив-52 в дозе 50 мг/кг — на 52% (р<0,001), 41% (р<0,001) и 44% (р<0,001) соответственно. Если расположить указанные вещества в порядке уменьшения исследуемого эффекта, то получится следующий ряд: ГТЛ (200 мг/кг), ЛТЛ (50 мг/кг), прополис, лив-52, апилак и ГТЛ (50 мг/кг). Так, наибольшим, и примерно равным, эффектом снижать цитолиз гепатоцитов обладают ГТЛ в дозе 200 мг/кг и ЛТЛ в дозе 50 мг/кг; в этой активности они значительно превосходят ГТЛ в дозе 50 мг/кг, прополис, лив-52 и апилак в дозе 50 мг/кг.
Превентивное введение ГТЛ в дозах 50 и 200 мг/кг уменьшило активность щелочной фосфатазы по сравнению с контролем на 22% (р<0,001) и 55% (р<0,001), ЛТЛ в дозе 50 мг/кг — на 50% (р<0,001), прополис, апилак и лив- 52 в дозе 50 мг/кг — на 53% (р<0,001), 42% (р<0,001) и 54% (р<0,001) соответственно. Эффект нормализации холестаза оказалься примерно равный у
ГТЛ (200 мг/кг), ЛТЛ (50мг/кг), прополиса и официнального гепатопротектора лив-52. Применение апилака и ГТЛ в дозе 50 мг/кг на фоне СС14-интоксикации не привело к нормализации циркуляции желчи.
Результаты опытов по влиянию продуктов пчеловодства и препарата сравнения лив-52 на уровень холестерина и триглицеридов в печени при СС14- поражении представлены в таблице 23 и на рис.7.

Таблица 23

Влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок, прополиса, апилака, лив-52 на содержание холестерина и триглицеридов печени крыс при тетрахлорметановой интоксикации

Группа Холестерин, г/кг Триглицериды, мкмоль/г
п/п животных М±т Р М±ш Р
1 2 3 4 5 6
1 Интактные животные, п=8 2,73± 0,17 17,70± 1,03
2 Животные с СС14

интоксикацией

(контроль),

п=8

4,57+ 0,10 Р2-1<0,001 68,51± 5,10 Р2.1<0,001
3 Животные, получившие ГТЛ 50 мг/кг и СС14, п=8 3,18± 0,24 Р3-2<0,01 Р3.1>0,05 41,18± 3,52 Р3-2<0,01 Рз-1<0,001
4 Животные, получившие ГТЛ 200 мг/кг и СС14, п=8 2,98± 0,07 Р4.2<0,001

Р4_!>0,05

Р4.з>0,05

28,64± 2,16 Р4.2<0,001 Р4.1<0,001 Р4.з<0,01
5 Животные, получившие ЛТЛ 50 мг/кг и СС14, п=8 3,02± 0,22 Р52<0,001 Р5.1>0,05 Р5-з>0,05 Р5-4>0,05 32,40± 1,92 Р5-2<0,001 Р5-1<0,001 Р5-з>0,05 Р5-4>0,05

 

1 2 3 4 5 6
6 Животные, 3,64± Р6.2<0,001 45,06+ Рб-2<0,01
получившие 0,15 Р6-1<0,01 3,65 Р6.1<0,001
прополис 50 Р6-з>0,05 Рб-з>0,05
мг/кг и СС14) Р6-4<0,01 Р6-4<0,01
п=8 Р6-5<0,05 Рб-5<0,05
7 Животные, 3,71± Р7-2<0,01 57,46± Р7-2>0,05
получившие 0,14 Р7.1<0,01 3,03 Р7.,<0,001
апилак 50 Р7-з>0,05 Р7.3<0,02
мг/кг и СС14> Р7.4>0,05 Р7.4<0,001
п=8 Р7.з>0,05 Р7.5<0,001
Р7-б>0,05 Р7-б<0,05
8 Животные, 3,80± Р8-2<0,01 57,08± Р8-2>0,05
получившие 0,20 Р8-1<0,01 4,16 Р8-.<0,001
лив-52 50 Р8-з>0,05 Р8-з<0,05
мг/кг, п=8 Р8-4<0,01 Р8.4<0,001
Р8-5<0,05 Р85<0,01
Р8-б>0,05 Р8-б>0,05
Р8.7>0,05 Р8-7>0,05

 

Примечание: п — количество животных;
Р — достоверность различий между группами.

Прием как гомогената трутневых личинок, так и лиофилизата, в условиях интоксикации сопровождался выраженным гипохолестеринемическим эффектом, нормализующим уровень холестерина печени, тогда как изменения при приеме прополиса, апилака и лив-52 в аналогичных условиях имели тенденцию к снижению по сравнению с контрольным уровнем ( на 20%, р<0,001, 19%, р<0,001, 17%, р<0,01 соответственно), но восстановления нормального уровня холестерина в печени не произошло.
Профилактический прием ГТЛ в дозах 50 и 200 мг/кг при в аналогичных условиях снизил количество триглицеридов по сравнению с контрольными данными на 30% (р<0,01) и 35% (р<0,001), ЛТЛ в дозе 50 мг/кг — на 53% (р<0,001), прополиса — на 34% (р<0,01). При этом эффективность ГТЛ в дозе 200 мг/кг и ЛТЛ в дозе 50 мг/кг была достоверно выше, нежели у ГТЛ и прополиса в дозе 50 мг/кг. Приём апилака и лив-52 фактически не изменил контрольных показателей.
Таким образом, ГТЛ в дозе 200 мг/кг и ЛТЛ в дозе 50 мг/кг имели более значительные гипохолестеринемический и гипотриглицеридемический эффекты в условиях токсического поражения печени, чем другие продукты пчеловодства и препарат сравнения лив-52. Выраженность действия ГТЛ в дозе 50 мг/кг и прополиса в этих условиях оказалась равнозначной.
Результаты, отражающие влияние продуктов пчеловодства и препарата лив-52 на уровень общего билирубина крови и содержание гликогена в печени, представлены в таблице 24 и на рис.7.

Таблица 24

Влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок, прополиса, апилака, лив-52 на уровень общего билирубина сыворотки крови и содержание гликогена в печени крыс с СС14-интоксикацией

№ п/п Группа животных Общий билирубин крови, мкмоль/л Гликоген печени, г/кг
М±ш Р М±ш Р
1 2 3 4 5 6
1 Интактные животные, п=8 8,04±0,91 19,8211,55
2 Животные с СС14

интоксикацией (контроль), п=8

13,5311,05 Р2-1<0,001 8,3410,36 Р2-1<0,001
3 Животные, получившие ГТЛ 50 мг/кг и СС14, п=8 9,87±1,04 Р3-2<0,05 Рз-1<0,01 11,1510,69 Рз-2<0,02 Рз-1<0,01
4 Животные, получившие ГТЛ 200 мг/кг и СС14, п=8 8,39±0,64 Р4.2<0,001

Р4_1>0,05

Р4-з>0,05

12,2410,56 Р4.2<0,001

Р4.1<0,01

Р4.3>0,05

 

1 2 3 4 5 6
5 Животные, 8,51±0,74 Р52<0,001 11,42±1,15 Р5-2<0,05
получившие Р5-1>0,05 Р5.1<0,01
ЛТЛ 50 мг/кг и Р5-З>0,05 Р5-З>0,05
ССЦ, п=8 Р5.4>0,05 Р5-4>0,05
6 Животные, 8,53±0,64 Р6-2<0,01 11,47+0,81 Р6-2<0,01
получившие Р6-1>0,05 Р6-1<0,01
прополис 50 Р6-з>0,05 Р6-з>0,05
мг/кг и ССЦ, Р6-4>0,05 Рб-4>0,05
п=8 Р6-5>0,05 Р6_5>0,05
7 Животные, 10,86±0,70 Р7-2>0,05 9,67±0,53 Р7.2>0,05
получившие Р7.,<0,01 Р7-1<0,001
апилак 50 мг/кг Р7-З>0,05 Р7-з>0,05
и ССЦ, п=8 Р7.4<0,05 Р7.4<0,02
Р7.5<0,05 Р7-5>0,05
Р7-б<0,05 Р7.б>0,05
8 Животные, 8,82±0,85 Р8.2<0,01 11,00+0,65 Р8-2<0,01
получившие Рв-.>0;05 Р8.,<0,01
лив-52 50 мг/кг Р8-з>0,05 Р8-з>0,05
и ССЦ, п=8 Р8-4>0,05 Р8-4>0,05
Р8-5>0,05 Р8-5>0,05
Р8-б>0,05 Р8-б>0,05
Р87>0,05 Р87>0,05

 

Примечание: п — количество животных;
Р — достоверность различий между группами.

Из данных таблицы 24 следует, что при тетрахлорметановой интоксикации применение ГТЛ в дозе 200 мг/кг, ЛТЛ в дозе 50 мг/кг, прополиса и лив-52 привело к нормализации содержания общего билирубина в сыворотке крови. Введение ГТЛ в дозе 50 мг/кг хотя и снизило уровень общего билирубина крови на 27% (р<0,01) по сравнению с контролем, но это снижение не привело к нормализации данного показателя. Применение в тех же условиях апилака в дозе 50 мг/кг не сопровождалось достоверными изменениями данного показателя по отношению к контрольным данным. Сравнительное влияние различных продуктов пчеловодства и лив-52 на функциональное состояние печени при тетрахлорметановой интоксикации
На содержание гликогена в печени в условиях СС14-интоксикации введение ГТЛ в дозе 50 мг/кг, ЛТЛ в дозе 50 мг/кг, прополиса и лив-52 оказало примерно одинаковое действие — повысило на 34% (р<0,02), 37% (р<0,05), 38% (р<0,01), 32% (р<0,01) соответственно. В отличие от этого применение ГТЛ в дозе 200 мг/кг в повысило количество гликогена на 47% (р<0,001), а применение апилака не вызвало достоверно значимых изменений относительно контроля.
Итак, ГТЛ, ЛТЛ, прополис и лив-52 в условиях СС1гпоражения печени оказали нормализующий эффект на уровень общего билирубина сыворотки крови и гликогена в печени, при этом повышение дозы ГТЛ до 200 мг/кг вызвало наибольшее повышение количества гликогена (до 47%, р<0,001).

6.2. ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ

Результаты предыдущих опытов свидетельствуют о выраженном активирующем влиянии трутневого расплода на клеточные и гуморальные факторы естественного иммунитета в условиях СС14-интоксикации. Это определило необходимость проведения серии опытов по сравнительной оценке влияния препаратов прополиса, апилака, трутневого расплода в нативной и лиофилизированной форме, а также лив-52 на активность факторов неспецифической резистентности. Полученные результаты представлены в таблицах 25, 26 и на рис. 8.

Таблица 25

Влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок,
прополиса, апилака, лив-52 на активность факторов неспецифической резистентности при ССЦ-интоксикации

Группы Лизоцим, р-ЛИЗИНЫ, БАСК,
п/п животных % активности % активности % активности
1 2 3 4 5
1 Интактные животные, п-8 46,3812,31 71,9612,72 68,2613,18
2 Животные с ССЦ- интоксикацией (контроль), п=8 69,0013,23 Р2-к0,001 26,9811,36 Рм<0,001 17,8810,77 Ры<0,001
3 Животные, получившие ГТЛ 50 мг/кг и СС14, п=8 52,4712,96

Рз-2<0,01

Рз-1>0,05

42,5413,41

Рз-2<0,01

Рз-1<0,001

51,0213,06

Рз-2<0,001

Рз-к0,01

4 Животные, получившие ГТЛ 200 мг/кг и СС14, п=8 45,8813,05 р4-2<0,01 р4-1>0,05 Р4.З>0,05 54,8414,33 р4-2<0,001 Р4-К0,02 Р4-З>0,05 60,4313,39

р4-2<0,001

р4-1>0,05

Р4-з>0,05

 

1 2 3 4 5
5 Животные, 47,38+2,83 48,26±2,63 52,72±3,38
получившие ЛТЛ р5-2<0,001 р5-2<0,001 р5-2<0,001
50 мг/кг и ССЦ, Р5-1>0,05 Р5-1<0,001 Рь-1<0,02
п=8 Р5-з>0,05 Р5-з>0,05 Р5-з>0,05
Р5-4>0,05 Р5-4>0,05 Р5-4>0,05
6 Животные, 48,50±2,74 43,56+2,22 48,84+3,40
получившие Рб-?<0,001 Рб-2<0,001 Рб-2<0,001
прополис 50 Р6-1>0,05 Рб-1 <0,001 Рб-к0,01
мг/кг и ССЦ, п=8 Р6-з>0,05 Р6-з>0,05 Р6-з>0,05
Р6-4>0,05 Р6.4<0,05 Р6.4>0,05
Рб-з>0,05 Р6-4>0,05 Р6-4>0,05
7 Животные, 56,00±3,99 39,86±2,94 36,58±2,50
получившие Р?-2>0,05 Р7-2<0,001 Р7-2<0,001
апилак 50 мг/кг и Р?-1 <0,001 Р7-1 <0,001 Р7-к0,001
ССЦ, п=8 Р7-з>0,05 Р7-з>0,05 Р7-з<0,02
Р7.4<0,05 Р7-4<0,05 Р7.4<0,01
Р7_5>0,05 Р7.5>0,05 Р7.5<0,01
Р7-б>0,05 Р7-б>0,05 Р7-б<0,05
8 Животные, 62,00±3,11 33,67±3,07 26,42НЬ2,44
получившие лив- р8-2>0,05 Рв-2>0,05 р8-2<0,01
52 50 мг/кг и Р8-1<0,01 Р8.,<0,001 р8.,<0,001
ССЦ, п=8 Р8-з>0,05 Р8-з<0,01 Р8-з<0,001
Р8-4<0,02 Р84<0,01 Р8.4<0,001
Р8.5<0,02 Р8-5<0,02 Р8.5<0,001
Р8-б<0,02 Р8-б<0,05 Р8-б<0,01
Р8-7>0,05 Р8.7>0,05 Р8.7<0,05

 

Примечание: п — количество животных;
Р — достоверность различий между группами.
Как следует из таблицы 25 в условиях острой интоксикации тетрахлорметаном ГТЛ и ЛТЛ в исследуемых дозах наряду с прополисом нормализует активность лизоцима сыворотки крови, что не наблюдалось при применении апилака и препарата лив-52.
В отличие от этого активность (3-лизинов до нормы не восстановило ни одно из перечисленных веществ, но больший активирующий эффект оказали
ГТЛ в дозе 200 мг/кг и ЛТЛ в дозе 50 мг/кг, повысив активность ß-лизинов по сравнению с контролем на 103% (р<0,001) и 79% (р<0,001) соответственно. Введение прополиса повысило активность ß-лизинов на 62% (р<0,001), а ГТЛ в дозе 50 мг/кг и апилака — на 58% (р<0,001) и 48% (р<0,001) соответственно. Применение лив-52 не вызвало достоверных изменений.
Наиболее выраженное действие на бактерицидную активность сыворотки крови в условиях СС14-интоксикации оказало применение ГТЛ в дозе 200 мг/кг, обусловив повышение БАСК до нормальных величин. Прием в этих же условиях ЛТЛ в дозе 50 мг/кг повысил активность БАСК на 195% (р<0,001), ГТЛ в дозе 50 мг/кг — на 185% (р<0,001), прополиса, апилака и лив-52 — на 173% (р<0,001), 105% (р<0,001) и 48% (р<0,01) соответственно. Следовательно, наиболее выраженное и примерно равнозначное влияние на бактерицидную активность сыворотки крови оказали ГТЛ, ЛТЛ и прополис.
Таким образом, влияние нативной и лиофилизированной форм трутневого расплода на гуморальные факторы естественного иммунитета превосходило действие других продуктов пчеловодства и препарата лив-52.
Результаты изучения влияния ГТЛ, ЛТЛ, прополиса, апилака, лив-52 на фагоцитарную активность нейтрофилов крови у животных с тетрахлорметановой интоксикацией представлены в таблице 26 и на рис.8.
Сравнительное влияние различных продуктов пчеловодства и лив-52 на активность факторов естественного иммунитета при тетрахлорметановой
интоксикации

^ 80
<о 00

БАСК
ФАЛ
ПЗФ
ФИЛ
Лизоцим Бета-лизины

*_
достоверность различий по отношению к контролю
В Интактные
■ ГТЛ(50)+тетрахлорметан В ЛТЛ(50)+тетрахлорметан Н Апилак(50)+тетрахлорметан
■ Контроль
■ ГТЛ(200)+тетрахлорметан
■ Прополис(50)+тетрахлорметан в Лив(50)+тетрахлорметан

Рис.8

Таблица 26

Влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок, прополиса, апилака, лив-52 на фагоцитарную активность нейтрофилов крови крыс в условиях ССЦ-интоксикации

</
№ п/п Группы животных ФАЛ, % активности ПЗФ ФИЛ, ед. активности
1 2 3 4 5
1 Интактные животные, п=8 34,75±1,83 44,75±2,94 0,37±0,02
2 Животные с СС14— интоксикацией (контроль), п=8 11,75±0,99 Р2-1<0,001 16,75±1Д9 Р2.1<0,001 0,12±0,02 Р2-1<0,001